胎牛血清富含蛋白、生長因子、氨基酸、脂類、碳水化合物、維生素、微量元素等成分,是體外細胞培養(yǎng)所需的重要營養(yǎng)物質(zhì)之一,也是抗體藥研發(fā)人員經(jīng)常使用的原料試劑,其血源和生產(chǎn)工藝決定了最終產(chǎn)品的品質(zhì)和性能。
胎牛血清具有什么功能?
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調(diào)變它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白*失活,保護細胞不受傷害。
如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
解凍時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一;
分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);
切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀;
切勿將血清置于37℃過長時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩(wěn)定的組分也會因此受到影響,最終降低血清的品質(zhì);
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。